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考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线(考马斯亮蓝法测蛋白质含量)

更新时间:2023-08-11 17:59:05

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大家好,我是小环,我来为大家解答以上问题。考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线,考马斯亮蓝法测蛋白质含量很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、公式是根据测量结果自己算出来的: 考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5],考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力,通过疏水作用与蛋白质相结合,形成的蓝色蛋白质一染料复合物,在595 nm处有最大吸光度,复合物1 h内保持稳定。

2、在一定的蛋白质浓度范围内,蛋白质一染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质含量的测定。

3、 测定时,用同一种标准蛋白(自己选,如牛血清白蛋白,所选的标准蛋白最好是纯化的待测蛋白——但这是理想状态,一般选择氨基酸构成与待测蛋白相近的标准蛋白。

4、否则将影响测定结果)配制成覆盖待测样品蛋白浓度的标准蛋白溶液,然后加等量考马斯亮蓝G-250,混匀后用紫外分光光度计测定个标准蛋白样品的吸光值。

5、并测定待测样品(可稀释成几个不同浓度的样品同时测)的吸光值。

6、所有样品重复测三次。

7、 最后以蛋白标准溶液浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

8、计算出回归方程。

9、如Y=aX+b 让后把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

10、 只要上数据库一搜,这样的论文多的是,要加强自学能力呀!——赚点分真辛苦!。

本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。

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